07281010-生物化学实验技术-生物技术（动物）专业实验项目卡

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

动物肝脏DNA的提取和鉴定

实验项目编号

0728101001

实验学时数

6

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

熟悉离心技术的基本原理及应用中注意事项。掌握动物肝脏DNA的提取和鉴定方法及原理。

实验内容

根据DNP和RNP在不同浓度氯化钠溶液中溶解度不同，从动物肝脏中提取DNA；通过对核酸的水解及显色反应，对脱氧核糖和嘌呤及磷酸进行鉴定。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

离心机

TGL-16B

1台

紫外可见分光光度计

T6新世纪

1台

水浴锅

HHS-11-2

1个

移液器

1μL，10μL，100μL，1000μ

1个

本实验项目

消耗材料物品

硫酸

氢氧化钠

乙醇

氯仿

硝酸银

二苯胺

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

盐析及凝胶过滤分离血清γ-球蛋白

实验项目编号

0728101002

实验学时数

6

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

通过蛋白质的盐析和凝胶过滤脱盐，掌握盐析和凝胶过滤实验的原理、操作步骤、注意事项，及该技术在生物大分子分离纯化中的应用。

实验内容

根据不同蛋白质在不同浓度饱和硫酸铵溶度的不同，采用33%饱和硫酸铵溶度对血清γ-球蛋白进行初步盐析沉淀；根据不同大小分子量蛋白质在经过凝胶层析柱洗脱时，洗脱出层析柱的先后顺序不同，将蛋白质和硫酸铵分离，经过对蛋白质和硫酸铵的检测，对实验进行验证。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

离心机

TGL-16B

1台

部分收集器

BSZ-100

1台

蠕动泵

BT00-600M

1台

核酸蛋白检测仪

HD21-88

1台

本实验项目

消耗材料物品

硫酸铵

葡聚糖凝胶G25

醋酸铵

磺基水杨酸

氯化钡

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

离子交换层析分离血清蛋白质

实验项目编号

0728101003

实验学时数

6

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

通过对血清蛋白质的离子交换分离和纯化，掌握离子交换层析实验的原理、操作步骤、注意事项，及该技术在生物大分子分离纯化中的应用。

实验内容

根据不同蛋白质具有不同的等电点，采用阳离子或阴离子交换剂，对带有不同电荷的蛋白质进行分离。采用DEAE纤维素装柱，缓冲液pH值为6.5，血清样品通过层析柱，将白蛋白和球蛋白分离，再调溶液的离子强度将β球蛋白和γ球蛋白分离，通过琼脂糖扩散电泳，检测γ球蛋白。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

离心机

TGL-16B

1台

部分收集器

SZ-100

1台

蠕动泵

HL-2

1台

电泳仪

DYY-10C

1台

电泳槽

DYCP38B

1台

本实验项目

消耗材料物品

DEAE32

琼脂糖

醋酸铵

磺基水杨酸

氯化钠

硫酸铵

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

亲和层析

实验项目编号

0728101004

实验学时数

6

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

熟悉亲和层析的基本原理，掌握亲和层析操作步骤及该技术在蛋白质和核酸分离纯化中的应用。

实验内容

将蛋白质混合液样品加至亲和层析柱中，用洗脱液进行洗脱，至洗脱液中无蛋白质出现，改变洗脱液，洗脱目的蛋白质。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

层析柱

2ml

1个

部分收集器

SZ-100

1台

核酸蛋白检测仪

HD-4

1台

本实验项目

消耗材料物品

溴化氰

碳酸氢钠

氯化钠

磷酸三钾

硼酸

碳酸氢铵

醋酸

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白质

实验项目编号

0728101005

实验学时数

6

实验分组情况

每组 1 人

实验目的

掌握垂直板电泳的基本原理、操作步骤、注意事项及该技术在生化和分子生物研究中的应用。

实验内容

将丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺按一定比例制备垂直板电泳凝胶，将血清样品点在点样孔的相应位置，通电进行电泳，电泳结束后进行蛋白染色和脱色。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

电泳仪

DYY-10C

1台

电泳槽

DYCZ-24D

1个

本实验项目

消耗材料物品

丙烯酰胺

甲叉双丙烯酰胺

Tris

盐酸

过硫酸铵

四乙基乙二胺

甘氨酸

冰醋酸

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

双向电泳

实验项目编号

0728101006

实验学时数

12

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

熟悉双向电泳的基本原理，掌握操作步骤、注意事项及该技术在生化和分子生物研究中的应用。

实验内容

样品的制备，进行第一向等电聚焦电泳，结束后制备垂直板电泳，进行电泳，结束后，凝胶的染色和脱色。对蛋白点通过计算机进行分析。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

电泳仪

DYY-10C

1台

电泳槽

DYCZ-24DN

1个

双向电泳仪

proteanIEFcell

1台

双向电泳槽

DYCZ-26C

1个

本实验项目

消耗材料物品

丙烯酰胺

甲叉双丙烯酰胺

双向电泳条

Tris

甘油

尿素

溴酚蓝

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

Western印迹技术

实验项目编号

0728101007

实验学时数

6

实验分组情况

每组 2 人

实验目的

熟悉Western印迹技术的基本原理，掌握操作步骤、注意事项及该技术在生化和分子生物研究中的应用。

实验内容

本实验包括电泳和蛋白质杂交两部分内容。第一部分主要是SDS电泳技术内容，垂直板制备，点样，电泳；第二部分包括转膜和蛋白杂交，对电泳凝胶进行电转膜，再用相应的抗体对目的蛋白进行测。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

电泳仪

DYY-10C

1台

电泳槽

DYCZ-24DN

1个

电转槽

M280230

1个

杂交仪

OV4

1台

本实验项目

消耗材料物品

丙烯酰胺

甲叉双丙烯酰胺

硝酸纤维素膜

Tris

异丙醇

磷酸氢二钠

PMSF

备注

实验项目所属课程名称

生物化学实验技术

课程编号

07281010

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

生物技术（动物）

√

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

√

√

实验项目名称

蛋白质含量测定

实验项目编号

0728101008

实验学时数

4

实验分组情况

每组 1 人

实验目的

掌握分光光度技术的基本原理及应用；掌握各种蛋白质检测方法的操作步骤及各种检测方法的优缺点。

实验内容

G250方法检测血清蛋白质含量，包括两种方法：标准曲线和公式计算法。紫外分光光度法检测血清蛋白质含量。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

规格型号

数 量

紫外可见分光光度计

T6新世纪

1台

本实验项目

消耗材料物品

标准牛血清白蛋白

乙醇

G250

磷酸

待测蛋白样品

备注