09481022-分子克隆及细胞技术综合实验-动物科学专业

《分子克隆及细胞技术(综合实验)》教学大纲

教学单位：畜牧兽医学院

课程名称：分子克隆及细胞技术(综合实验)

英文名称：The Experiment of Molecular Cloning and Cytology

课程代码：09481022

课程性质：专业实践环节

实习学时：1周

实习学分：2学分

开课学期：第五学期

面向专业：动物科学专业

一、课程目的与任务

通过本专业实践环节使学生进一步巩固分子克隆和细胞工程的相关理论，掌握DNA分离、重组DNA的连接、转化及鉴定、细胞培养、细胞冻存的技术操作，培养学生的实践动手和综合分析问题和解决问题的能力。本专业实践环节总时间为1周。

本实验课的主要任务是通过让学习对一个特定的基因进行克隆，构建成真核表达载体，对真核细胞转染，并对转染细胞进行冻存进行亲自操作，增加学生对基因工程和细胞工程的感性认识，训练其实际操作能力，最终掌握分子克隆、细胞工程等常用技术。

二、教学基本内容、要求与学时分配

实习一、基因亚克隆和表达载体构建

（一）实习内容：目的基因与表达载体的连接、转化大肠杆菌、重组DNA分子的鉴定及扩增。

（二）实习要求：学生亲自设计、亲自操作，教师现场指导。

（三）学时分配：2.5d

实习二、细胞复苏、基因转染

（一）实习内容： 细胞的复苏、重组表达质粒的转染。

（二）实习要求：学生亲自动手，教师现场指导。

（三）学时分配：1.5d

实习三、细胞筛选和冻存

（一）实习内容：阳性细胞克隆的筛选、扩大培养及冻存的方法。

（二）实习要求：学生亲自动手，教师现场指导。

（三）学时分配：1d

三、实习教材、教学指导书或参考书目：

[1]吴乃虎,《基因工程原理》上下册，科学出版社，2001年第二版

[2]J.萨姆布鲁克，分子克隆实验指南,科学出版社，2002年，第三版

[3].C.W.迪芬巴赫等(1998),PCR技术实验指南，科学出版社

[4]A.J.哈伍德(2002),DNA及RNA基本实验技术,科学出版社

[5]梁国栋(2001)，最新分子生物学实验技术，科学出版社

四、现有实习基地概况：

生物技术综合实验实室有细胞培养箱2台，生物安全柜5台，PCR仪5台，电泳仪5台，台式离心机5台，摇床3台、恒温箱5台，发酵罐2台、纯化系统1套、完全可以满足实习需要。

五、考核要求、考核方式及成绩评定标准

专业实践环节重点考核学生综合运用基因工程及细胞工程有关知识和实际动手操作能力。

从实验理论、实验设计和结果分析、平时实验成绩等方面综合考核给出实验成绩。

以实验设计、实验报告、结果总结、出勤、课堂表现综合考核给出实验成绩。其中：实验设计20%、实验报告30%、结果总结30%、出勤10%、课堂表现10%。

六、制定人：逄大欣

七、审核人：欧阳红生 日 期：2009年11月13日

八、学院审定记录：

本实验教习大纲已经学院教学委员会审核通过。

教学院长签字：