9fq吉林大学动物科技实验教学中心
吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡
实验教学中心名称：动物科技实验教学中心 实验室名称：分子生物学实验室
实验项目所属课程名称
基因工程原理
课程编号
07281022
课程类别
(打√)
普通教育课程
学科基础课程
专业教育课程
实践教学环节
面向专业
动物科学
√
实验类型
基础
设计
综合
研究
实验性质
必做
选做
其他
实验项目名称
PCR扩增目的基因
实验项目编号
0728102201
实验学时数
2
实验分组情况
每组 1 人
实验目的
掌握PCR技术要领，了解影响PCR的因素，学会自行克隆目的基因。
实验内容
根据自己的实验需求，各小组自行学习引物的设计并进行相应的PCR反应。
本实验项目所用的主要仪器设备
仪器设备名称
规格型号
数 量
PCR热循环仪
（德国）BIOMETRA T-Gradient
1
移液器
Eppendorf（2-1000微升）
4×10
无菌PCR管
0.2ml
10
本实验项目
消耗材料物品
双蒸水
Ex Taq buffer（Mg2+ plus）
dNTP混合物
引物
模板DNA
Taq DNA聚合酶
备注
说明：1、课程编号可从本专业的课程计划中查找，实验项目编号为课程编号+2位顺序号。
2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。
任课教师(签名)： 专业负责人(签名)： 主管院长(签名)：
填表日期： 2009 年 8 月 28 日
琼脂糖凝胶电泳
0728102202
掌握琼脂糖凝胶电泳原理、方法。了解凝胶成像系统的使用方法。
琼脂糖凝胶的制备
电泳液的配制
电泳结果的紫外成像
电泳仪
bio-rad
电泳槽
Eppendorf（20微升）
凝胶成像系统
Gel Doc2000
琼脂糖
1×TAE/TBE电泳液
EB
回收与连接
0728102203
掌握从凝胶中回收DNA片段，探索并确立外源DNA与载体连接的最佳条件。
1.琼脂糖凝胶电泳，切割分离目的DNA，回收、纯化目的DNA
2.连接反应，设立不同温度及时段的对照组
回收柱
EP管
T4 DNA连接酶
转化
0728102204
学习外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术
1.质粒与感受态细胞孵育转化
2.配制氨苄、X-gal和IPTG培养基
2.感受态细胞的培养
超净工作台
无限制（一般国产即可）
摇床
LB液体培养基
LB固体培养基
感受态细胞
质粒DNA的提取与纯化
0728102205
学习与掌握质粒DNA的提取与纯化方法，比较不同的筛选方法的假阳性率。
1.DNA的碱性提取法
2.DNA的纯化
3.比较氨苄筛选和蓝白斑筛选的假阳性率。
离心机
无限制（一般国产达到16000g即可）
质粒DNA回收试剂盒
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