Dxd吉林大学动物科技实验教学中心
吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡
实验教学中心名称：动物科技实验教学中心 实验室名称：分子生物学实验室
实验项目所属课程名称
基因工程实验技术
课程编号
07281007
课程类别
(打√)
普通教育课程
学科基础课程
专业教育课程
实践教学环节
面向专业
生物技术专业（动物）
√
实验类型
基础
设计
综合
研究
实验性质
必做
选做
其他
实验项目名称
PCR实验
实验项目编号
0728100701
实验学时数
2学时
实验分组情况
每组 1 人
实验目的
掌握PCR反应的基本原理与实验技术。
实验内容
聚合酶链式反应（PCR）
本实验项目所用的主要仪器设备
仪器设备名称
规格型号
数 量
基因扩增仪
TC-25/H
6台
离心机
TGL-16B
移液器
0.2ml
10支
0.01ml
冰盒
10个
本实验项目
消耗材料物品
0.2ml枪头，0.2ml离心管，引物，模板DNA，PCR试剂盒
备注
说明：1、课程编号可从本专业的课程计划中查找，实验项目编号为课程编号+2位顺序号。
2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。
任课教师(签名)： 专业负责人(签名) 主管院长(签名)：
填表日期：2009 年 11月 14 日
DNA凝胶电泳
0728100702
掌握水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、质粒DNA的构型以及分子量的大小。
琼脂糖凝胶电泳，溴乙锭染色，紫外灯下检测，拍照
电泳仪
DYY-10C
5台
水平式电泳槽
DYCP-31D
5个
UVP凝胶成像系统
031606-001
1台
美的微波炉
KD23B-AV
BS系列电子天平
BS124S
0.2ml枪头，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，DNA Marker，EB，琼脂糖，三角瓶
任课教师(签名)： 专业负责人(签名)： 主管院长(签名)：
DNA片段回收
0728100703
4学时
掌握琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段的原理与操作。
琼脂糖凝胶电泳，凝胶回收DNA片段
水浴锅
SSW-420-2S
2台
1ml
1ml枪头，0.2ml枪头，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，DNA Marker，EB，琼脂糖，手术刀片，DNA凝胶回收试剂盒，三角瓶
DNA连接
0728100704
学掌握DNA分子（PCR产物）与T载体连接的原理与操作方法。
PCR产物与T载体的连接
pMD-18T-simple试剂盒，T4 DNA连接酶，0.2ml枪头，0.2ml离心管
DNA转化
0728100705
熟悉重组DNA分子转化E.coli的原理与基本操作方法；掌握E.coli感受态细胞的制备及DNA转化的方法；了解提高转化效率的基本思路。
E.coli感受态细胞的制备，热激法转化E.coli感受态细胞
超净工作台
SW-CJ-IF
制冰机
SIM-F140
恒温振荡器
HZQ-C
培养箱
HPX-9052MBE
低温离心机
40528746
感受态细胞，LB液体培养基，LB液体培养基（加AMP抗性），1ml枪头，0.2ml枪头，1.5ml离心管，50ml离心管
质粒DNA提取
0728100706
掌握碱变性制备质粒DNA的原理及方法。
细菌培养及回收，碱变性法提取质粒DNA，DNA电泳及检测
DNA质粒提取试剂盒，1ml枪头，0.2ml枪头，LB液体培养基，LB固体培养基平板（加AMP），1.5ml离心管，丙三醇，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，DNA Marker，EB，琼脂糖
DNA酶切
0728100707
掌握用限制性内切酶酶切DNA片段的原理与方法。
DNA酶切，DNA电泳，酶切结果分析
质粒DNA，限制性内切酶，0.2ml枪头，500uL离心管，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，DNA Marker，EB，琼脂糖
DNA Southern blot分析
0728100708
28学时
掌握分子杂交的原理和过程；掌握Southern印迹杂交技术的主要方法。
DNA酶切，DNA电泳，Southern印迹杂交及检测
分子杂交仪
L200
3台
1ml枪头，0.2ml枪头，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，DNA Marker，EB，琼脂糖，Southern印迹杂交及检测试剂盒，尼龙膜，Southern杂交液，中和液，变性液，20×SSC，2×SSC，Wash Ⅱ，Anti-DIG-AP，Protein K，Wash Ⅰ
RNA提取
0728100709
熟悉总RNA和mRNA提取的基本原理，掌握从真核细胞中提取总RNA的方法。
RNA提取，RNA电泳
1ml枪头，0.2ml枪头，1×TAE电泳缓冲液，一次性手套，RNA Marker，EB，琼脂糖，TRnzol，PBS，乙醇，Tris-平衡酚，氯仿，猪肝脏，DEPC，液氮，二甲基甲酰铵，异丙醇
实时定量PCR
0728100710
掌握实时定量PCR技术的原理及操作方法。
实时定量PCR技术，标准曲线的制作，待测样品的定量检测
实时定量PCR仪
ABI7300
10ul
10ul枪头，0.2ml枪头，0.2ml离心管，引物，模板DNA，实时定量PCR反应试剂盒
填表日期：2009年 11月 14 日
上一条：07281008-分子生物学B-动医专业实验项目卡
下一条：07281006-环境毒理学-动物医学（公卫）专业实验项目卡
【关闭】
