实验教学大纲

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07281022 基因工程原理-动物科学专业

发布日期:2010-01-06    点击:

aGG吉林大学动物科技实验教学中心

《基因工程原理》实验教学大纲

教学单位:畜牧兽医学院

课程名称:基因工程原理

英文名称:Molecular Biology

课程代码:07281022

课程类别:专业教育课

课程性质:选修课

学 时 数课程20学时,实验10学时

课程学分:1学分

开课学期:第五学期

面向专业:动物科学专业

一、实验课程教学目的与任务

《基因工程原理》实验课程主要内容是以分子克隆为基础的基因工程实验,是动物科学专业的一门专业选修课,通过本课程的学习,理解分子克隆的基本原理,掌握基因工程学研究的基本操作技能。

本实验课的任务是通过实验操作使学生学会引物设计、目的基因筛选、PCR扩增,目的基因的分离、纯化、连接和转化、鉴定的一般方法,为开展分子克隆研究打好基础。

、实验教学基本要求

1. 能够通过基因工程实验课的操作了解基因工程的基本原理、学会自行克隆基因,并将其连入目的载体,实现自行构建重组子的过程,并学会撰写合格的基因工程的实验报告。

2. 能够通过对比基因工程实验所设立对照组的分析,解释实验过程中存在的问题,能够从统计分析的水平上来鉴定PCR引物的特异性、转化的效率,不同的鉴定方法的有效性等,逐步提高学生解决基因工程实验的综合能力。

三、学生应掌握的实验技术及基本技能

1.学生能基本掌握分子克隆实验的要领,包括学会引物设计、目的基因筛选、PCR扩增,目的基因的分离、纯化、连接和转化、鉴定的一般方法。

2.培养和提高学生独立操作的能力。使学生较为系统全面地掌握运用基因工程学理论研究的技术和方法。

四、实验项目内容、学时分配和每组人数

序号

实验项目

内容提要

学时分配

每组人数

实验类型

实验性质

1

PCR扩增目的基因

根据自行设计的引物,选取对应的组织DNA进行PCR反应

2

1

设计性

必做

2

琼脂糖凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳实验的原理、实验条件、操作注意事项

2

1

基础性

必做

3

回收与连接

DNA回收、纯化后,进行连接反应,设立不同温度的对照组,探索连接的最佳条件

2

1

研究性

必做

4

转化

外源质粒DNA转入受体菌细胞,设立氨苄筛选和蓝白斑筛选对照组

2

1

基础性

必做

5

质粒DNA的提取与鉴定

碱变性抽提质粒DNA,采用双梅切鉴定目的条带,对蓝白斑和氨苄对照组进行假阳性检验

2

1

研究性

必做

aGG吉林大学动物科技实验教学中心

五、实验教材及主要参考书:

[1]楼士林等编著《基因工程》,科学出版社2002年第一版(21世纪高等院校教材,国家理科基地教材)

[2]吴乃虎《基因工程原理》上下册,科学出版社2002年第二版

六、考核要求、考核方式及成绩评定标准

本实验课考核分为实验报告和出勤,其中实验报告占70%,出勤成绩占30%。以实验设计的结果进行评定,包括PCR的结果,转化的效果,筛选的结果来鉴定实验的有效性,再根据学生对实验结果分析的合理性进行综合评定,做为实验报告分数。

本课程总成绩分为理论考试和实验成绩,其中理论考试占70%,实验课总成绩占30%。

七、制订人:于浩

八、审核人:欧阳红生 日 期:2009年11月13日

九、学院审定记录:

本实验教学大纲已经学院学术委员会审核通过。

教学院长签字:

吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡

实验教学中心名称动物科技实验教学中心 实验室名称分子生物学实验室

实验项目所属课程名称

基因工程原理

课程编号

07281022

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

动物科学

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

实验项目名称

PCR扩增目的基因

实验项目编号

0728102201

实验学时数

2

实验分组情况

每组 1

实验目的

掌握PCR技术要领,了解影响PCR的因素,学会自行克隆目的基因。

实验内容

根据自己的实验需求,各小组自行学习引物的设计并进行相应的PCR反应。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

PCR热循环仪

(德国)BIOMETRA T-Gradient

1

移液器

Eppendorf2-1000微升)

4×10

无菌PCR

0.2ml

10

本实验项目

消耗材料物品

双蒸水

Ex Taq bufferMg2+ plus

dNTP混合物

引物

模板DNA

Taq DNA聚合酶

备注

说明:1、课程编号可从本专业的课程计划中查找,实验项目编号为课程编号+2位顺序号。

2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。

任课教师(签名) 专业负责人(签名) 主管院长(签名)

填表日期: 2009 年 8 月 28

吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡

实验教学中心名称动物科技实验教学中心 实验室名称分子生物学实验室

实验项目所属课程名称

基因工程原理

课程编号

07281022

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

动物科学

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

实验项目名称

琼脂糖凝胶电泳

实验项目编号

0728102202

实验学时数

2

实验分组情况

每组 1

实验目的

掌握琼脂糖凝胶电泳原理、方法。了解凝胶成像系统的使用方法。

实验内容

琼脂糖凝胶的制备

电泳液的配制

琼脂糖凝胶电泳

电泳结果的紫外成像

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

电泳仪

bio-rad

1

电泳槽

bio-rad

1

移液器

Eppendorf20微升)

10

凝胶成像系统

Gel Doc2000

1

本实验项目

消耗材料物品

琼脂糖

1×TAE/TBE电泳液

EB

备注

说明:1、课程编号可从本专业的课程计划中查找,实验项目编号为课程编号+2位顺序号。

2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。

任课教师(签名) 专业负责人(签名) 主管院长(签名)

填表日期: 2009 年 8 月 28

吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡

实验教学中心名称动物科技实验教学中心 实验室名称分子生物学实验室

实验项目所属课程名称

基因工程原理

课程编号

07281022

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

动物科学

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

实验项目名称

回收与连接

实验项目编号

0728102203

实验学时数

2

实验分组情况

每组 1

实验目的

掌握从凝胶中回收DNA片段,探索并确立外源DNA与载体连接的最佳条件。

实验内容

1.琼脂糖凝胶电泳,切割分离目的DNA,回收、纯化目的DNA

2.连接反应,设立不同温度及时段的对照组

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

电泳仪

bio-rad

1

电泳槽

bio-rad

1

移液器

Eppendorf20微升)

10

凝胶成像系统

Gel Doc2000

1

本实验项目

消耗材料物品

回收柱

EP

T4 DNA连接酶

备注

说明:1、课程编号可从本专业的课程计划中查找,实验项目编号为课程编号+2位顺序号。

2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。

任课教师(签名) 专业负责人(签名) 主管院长(签名)

填表日期: 2009 年 8 月 28

吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡

实验教学中心名称动物科技实验教学中心 实验室名称分子生物学实验室

实验项目所属课程名称

基因工程原理

课程编号

07281022

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

动物科学

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

实验项目名称

转化

实验项目编号

0728102204

实验学时数

2

实验分组情况

每组 1

实验目的

学习外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术

实验内容

1.质粒与感受态细胞孵育转化

2.配制氨苄、X-galIPTG培养基

2.感受态细胞的培养

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

移液器

Eppendorf20微升)

10

超净工作台

无限制(一般国产即可)

1

摇床

无限制(一般国产即可)

1

本实验项目

消耗材料物品

LB液体培养基

LB固体培养基

感受态细胞

备注

说明:1、课程编号可从本专业的课程计划中查找,实验项目编号为课程编号+2位顺序号。

2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。

任课教师(签名) 专业负责人(签名) 主管院长(签名)

填表日期: 2009 年 8 月 28

吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡

实验教学中心名称动物科技实验教学中心 实验室名称分子生物学实验室

实验项目所属课程名称

基因工程原理

课程编号

07281022

课程类别

(打√)

普通教育课程

学科基础课程

专业教育课程

实践教学环节

面向专业

动物科学

实验类型

(打√)

基础

设计

综合

研究

实验性质

(打√)

必做

选做

其他

实验项目名称

质粒DNA的提取与纯化

实验项目编号

0728102205

实验学时数

2

实验分组情况

每组 1

实验目的

学习与掌握质粒DNA的提取与纯化方法,比较不同的筛选方法的假阳性率。

实验内容

1.DNA的碱性提取法

2.DNA的纯化

3.比较氨苄筛选和蓝白斑筛选的假阳性率。

本实验项目所用的主要仪器设备

仪器设备名称

移液器

Eppendorf20微升)

10

离心机

无限制(一般国产达到16000g即可)

1

本实验项目

消耗材料物品

质粒DNA回收试剂盒

备注

说明:1、课程编号可从本专业的课程计划中查找,实验项目编号为课程编号+2位顺序号。

2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。

任课教师(签名) 专业负责人(签名) 主管院长(签名)

填表日期: 2009 年 8 月 28

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