W7t吉林大学动物科技实验教学中心
《免疫学》实验教学大纲
教学单位：畜牧兽医学院
课程名称：免疫学
英文名称：Immunology
课程代码：07281009
课程类别：学科基础课
课程性质：限选课
学 时 数：课程40学时，实验16学时
课程学分：2学分
开课学期：第五学期
面向专业：生物技术（动物）、生物技术（植物）专业
一、实验课程教学目的与任务
《免疫学》实验课程是免疫学理论课程的一个重要组成部分，是生物技术专业（动物、植物）的一门学科基础限选课，为一门技术性较强的应用学科。通过本实验课程的学习，巩固《免疫学》理论课的教学理论，使学生较系统地掌握抗原抗体特异性反应的基本原理、基本方法和基本技能，具体掌握体液免疫的常用实验技术，熟悉细胞免疫的基本方法，了解现代免疫学技术的发展和应用。其主要任务是培养学生良好的实验习惯和科学严谨的工作作风，以及分析问题和解决问题的能力；为学生学习其他课程拓宽思路，为今后从事与免疫技术相关的科研工作、卫生检验及临床检验工作奠定牢固的基础。
二、实验教学基本要求
1.实验前学生必须预习免疫学实验教材，了解实验目的、掌握实验原理、操作步骤、注意事项、实验守则及实验室安全制度等。通过实验教材的阅读、相关免疫实验有关资料的查询，独立完成实验内容、撰写合格的实验报告；培养学生独立实验的能力。
2.能够融合每个免疫操作的实验原理、实验方法及相关的理论知识对实验结果进行分析、判断、归纳与综合。能够在实验中发现问题、分析问题并学习解决问题的科学方法，逐步提高学生运用免疫学知识和技能解决实际问题的能力。
3.能够完成符合规范要求的琼脂扩散、玫瑰花环实验设计性、综合性内容的实验，进行初步的具有研究性或创意性内容的实验。激发学生的学习主动性，逐步培养学生的创新能力。
三、学生应掌握的实验技术及基本技能
1.使学生较为系统全面地掌握免疫原理、技术和方法。基本掌握免疫学中抗原抗体特异性免疫的血清学技术，如凝集实验、琼脂扩散实验、ELISA、胶体金等实验的技术原理与操作方法和应用。
2.基本掌握免疫细胞及免疫分子检测的常用技术，如免疫细胞的分离技术、淋巴细胞的功能测定以及补体等免疫分子测定的相关技术原理与操作方法和应用。
3.培养和提高学生独立设计实验、动手操作的能力。使学生能够自主操作实验，学会实验的基本设计原则，能够根据教师提供的被检样品数据、事例或所学知识进行独立的实验设计与实验报告撰写。
四、实验项目内容、学时分配和每组人数
序号
实验项目
内容提要
学时
分配
每组
人数
实验
类别
性质
1
抗体的纯化
利用辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体
2
基础性
必做
直接凝集实验
标准布氏杆菌凝集抗原直接与阳性血清或病畜血清反应，观察有无凝集现象产生
3
间接凝集抑制
（妊娠实验）
尿样与已知 HCG 抗体或待检尿样混匀后再加致敏胶乳抗原颗粒，混匀观察有无凝集现象产生
4
琼脂扩散实验
利用双相双扩散原理检测鸡血清中是否有抗禽流感抗体
设计性
5
酶联免疫吸咐实验（ELISA）
双抗夹心ELISA检测乙型肝炎病毒表面抗原；抗原竞争法检测小分子药物或毒素
研究性
6
外周血单个核细胞分离与E玫瑰花环试验
密度梯度离心的方法分离豚鼠外周血淋巴细胞与家兔红细胞反应生成E玫瑰花环试验
综合性
五、实验教材及主要参考书：
1. 柳忠辉主编.《免疫学常用实验技术》.科学出版社，2002年；
2．沈关心，周汝麟.《现代免疫学实验技术》，湖北科学技术出版社，1998；
3．林清华.《免疫学实验》，武汉大学出版社，1999。
六、考核要求、考核方式及成绩评定标准
实验课成绩占总成绩的20%，主要以出勤、课堂表现、实验报告综合考核给出实验成绩。其中出勤占10%，课堂表现，动手能力占30%，实验报告（书面）（包括书写规范性、完整性及实验数据的正确性）占60%。
七、制订人：卢士英
八、审核人：柳增善 日 期：2009年11月13日
九、学院审定记录：
本实验教学大纲已经学院教学委员会审核通过。
教学院长签字：
吉林大学畜牧兽医学院实验项目卡
实验教学中心名称：动物科技实验教学中心 实验室名称：微生物与免疫实验室
实验项目所属课程名称
免疫学
课程编号
07281009
课程类别
(打√)
普通教育课程
学科基础课程
专业教育课程
实践教学环节
面向专业
生物技术（动物）专业
生物技术（植物）专业
√
实验类型
基础
设计
综合
研究
实验性质
选做
其他
实验项目名称
实验项目编号
0728100901
实验学时数
实验分组情况
每组 1 人
实验目的
掌握辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体的原理与方法
实验内容
辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体
本实验项目所用的主要仪器设备
仪器设备名称
规格型号
数 量
离心机
15-50mL
1台
电磁力搅拌器
需4℃放置
移液器
10μl、200μl
2支
本实验项目
消耗材料物品
血清、腹水或细胞培养上清液，正辛酸，0.06mol/L醋酸缓冲液(pH4.0)，0.01mol/L PBS（pH7. 4)），饱和硫酸铵，透析袋，pH试纸（pH5.5-9.0 pH3.8-5.5 pH0.5-5.0）或pH计、量筒、试管、记号笔、剪刀、镊子等。
备注
说明：1、课程编号可从本专业的课程计划中查找，实验项目编号为课程编号+2位顺序号。
2、项目卡各栏可根据内容进行调整。超出1页的请双面打印。
任课教师(签名)： 专业负责人(签名)： 主管院长(签名)：
填表日期： 2009年 11月 13日
0728100902
1. 掌握凝集试验的原理与操作技术。
2. 学会观察、分析凝集现象的方法。
标准布氏杆菌凝集抗原直接与阳性血清及病畜血清反应，观察有无凝集现象产生
恒温水浴箱
37℃
凝集原、凝集素、待检血清、玻片、试管、记号笔
填表日期： 2009年11月 13日
0728100903
1. 掌握间接凝集试验的原理与操作技术。
2. 学会观察、分析间接凝集现象的方法。
尿样与已知 HCG 抗体及待检尿样混匀后再加致敏胶乳抗原颗粒，混匀观察有无凝集现象产生
1.妊娠尿（含绒毛膜促性腺激素 human chorionic gonadotropin,HCG ）及非妊娠尿。
2. HCG免疫血清（已知抗体）。
3.致敏胶乳抗原，即吸附 HCG 的胶乳颗粒。
4.玻片、乳头滴管、牙签、记号笔等。
填表日期：2009年11月 13日
0728100904
1. 掌握琼脂扩散实验的原理与操作技术。
2. 学会观察、分析琼脂扩散结果。
微波炉
普通
标准禽流感抗原（沉淀原）、抗禽流感抗体（沉淀素）、待检鸡血清、梅花打孔器、1%琼脂糖、玻片或平皿、三角烧瓶、洒精灯、注射针头、记号笔等。
0728100905
每组 2 人
1. 掌握几种ELISA方法的实验原理与操作。
2.学会运用ELISA原理设计、分析相关实验。
1．双抗夹心ELISA检测乙型肝炎病毒表面抗原；
2．抗原竞争法检测小分子药物或毒素
酶联检测仪
全自动酶联检测仪DG5032
乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒、ELISA板、HRP酶标抗小鼠二抗、保温液、PBST洗涤液、OPD底物溶液、标准抗原，标准抗体，待检抗原，阴性对照、滤纸、平皿、记号笔等。
外周血单个核细胞分离与E玫瑰花环实验
0728100906
每组 4 人
1. 掌握密度梯度离心的方法分离外周单个核细胞的原理与方法。
2. 掌握玫瑰花环的形成的原理及操作。
1.淋淋巴细胞提取
2.红细胞的制备
3．玫瑰花环形成
低速甩平式TDL-42B
显微镜
双目生物显微镜 XSP-4C
肝素、阿氏液（Alsever液）、注射器或三角瓶、豚鼠、兔、聚蔗糖—泛影葡胺液、无Ca2+、Mg2+Hank’s液、0.8％戊二醛溶液、Giemsa—weight染色液、0.5%兔红细胞悬液、56℃30分钟处理过的胎牛血清。
填表日期：2009年11月13日W7t吉林大学动物科技实验教学中心
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